期刊简介
《中国实验诊断学》于1997年创刊，现为月刊，刊号为ISSN1007-4287，CN22-1257/R。为国家教育部主管，吉林大学中日联谊医院和上海第二医科大学瑞金医院共同主办，公开发行的全国性临床实验诊断学和检验医学学术期刊。被中国期刊全文数据库全文收录，并于2002年成为科技部中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊)。 宗旨是促进临床实验诊断学和临床检验学术交流和发展，评价实验检查在临床医学中的应用，帮助临床各科医师提高应用临床检验和实验诊断学的分析能力、理论水平、教学和科研素质。本着面向全国，面向实用，发展学科，跟踪学科发展前沿，传播新技术、新方法、新观念，紧密与临床联系，突出临床诊断特点，坚持百花齐放百家争鸣的原则，提倡科学求实、学术道德和精神文明，依国家出版法规办好本杂志。
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首页>中国实验诊断学杂志
- 杂志名称：中国实验诊断学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院
- 国际刊号：1007-4287
- 国内刊号：22-1257/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏
用于PCR产物检测的液相杂交法的优化
郭晏海；任峰玲；崔大祥；闫小君
关键词：PCR, 液相杂交, 优化
摘要：目的为了使液相交在检测更加灵敏、特异、快速.方法通过改进杂交液的成分,选择佳的探针浓度,使5'端标记生物素的PCR扩增产物与5'端标记地高辛的探针在PCR反应管中进行液相杂交,杂交条件为:94℃10s冷却到37℃10s即完成杂交.杂交后产物通过链霉素亲和素被固定在微孔表面,同时在含高浓度DMSO的杂交液中将非特异结合的探针解离,然后对被固定的特异杂交产物进行ELISA检测.结果液相杂交的条件优化:杂交液中DMSO浓度为300ml/L,探针浓度为0.5μmol/L,杂交温度为37℃.对60 bp～600 bp的PCR产物的杂交特异性无明显差异,可以检测到1×104copy的PCR产物,对100例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性为100%(30/30);HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性为100%(30/30);HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性为78.6%(22/28);HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性为66.7%(16/24),其余为阴性.结论该液相杂交法操作简单、快速、灵敏、特异,适合临床实验室使用.
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